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酵母選擇營(yíng)養(yǎng)缺陷培養(yǎng)基之：

 選擇性氨基酸混合物（Dropout Supplement, DO Supplement）

(單缺，雙缺，三缺，四缺)

背景描述：

酵母菌的質(zhì)粒篩選通常基于營(yíng)養(yǎng)缺陷型突變菌株的使用而開(kāi)展，這些菌株在缺乏某種特定培養(yǎng)基組分（比如氨基酸，嘌呤或嘧啶）的情況下無(wú)法生長(zhǎng)。當(dāng)轉(zhuǎn)化含有突變基因的質(zhì)粒后使得陽(yáng)性轉(zhuǎn)化克隆能夠在缺乏必需營(yíng)養(yǎng)組分的培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng)，正因如此，省卻成分培養(yǎng)基添加劑/選擇性氨基酸混合物（DO medium supplements）能用來(lái)篩選成功轉(zhuǎn)化的酵母培養(yǎng)物。

選擇性氨基酸混合物/氨基酸缺失混合物（DO medium supplements）同義名：

Yeast Media, Amino Acid Dropout Mixes

Yeast Synthetic Drop-out Medium Supplements

Complete Supplement Mixture (CSM)

Amino Acid Supplement (Drop-Out Mixture)

酵母營(yíng)養(yǎng)缺陷型培養(yǎng)基：

酵母選擇營(yíng)養(yǎng)缺陷型培養(yǎng)基（Synthetic Dropout Media, SD Media）多用來(lái)營(yíng)養(yǎng)缺陷型標(biāo)記基因的篩選和酵母轉(zhuǎn)化。這類培養(yǎng)基的配制根據(jù)商業(yè)化產(chǎn)品的區(qū)別有兩種方式。

*種方式：無(wú)氨基酸酵母氮源基礎(chǔ)+葡萄糖+選擇性氨基酸混合物（YNB without amino acids + glucose+ DO Supplement）

第二種方式：酵母基本培養(yǎng)基SD Base+選擇性氨基酸混合物（Yeast Minimal Base——SD Base + DO Supplement）

1. 商業(yè)化SD Base與YNB的差別在于前者已添加葡萄糖。
2. 有研究顯示，葡萄糖與氨基酸一起高壓滅菌會(huì)發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，培養(yǎng)基會(huì)變色，由淺黃到深褐色不等，可能對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)產(chǎn)生一些影響，但一般情況下不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)。因此，很多實(shí)驗(yàn)室經(jīng)過(guò)驗(yàn)證或通過(guò)對(duì)自身實(shí)驗(yàn)體系的評(píng)估，還是傾向用【第二種方式】來(lái)配制選擇性缺陷*培養(yǎng)基。
3. 我司（懋康生物）建議客戶根據(jù)自身需求來(lái)選擇產(chǎn)品和配制培養(yǎng)基。

酵母營(yíng)養(yǎng)缺陷型培養(yǎng)基工作原理：

特異的酵母營(yíng)養(yǎng)缺陷培養(yǎng)基用于選擇培養(yǎng)含特異載體的酵母或雜交篩選。其工作原理如下（以基于Matchmarker GAL4-based two hybrid assay系統(tǒng)用到的載體為例）：

誘餌載體（pGBKT7-Bait）含合成色氨酸（Trp）的基因，誘捕載體（pGADT7-Prey）含合成亮氨酸（Leu）的基因。前者的親代酵母菌株（如Y2HGold）本身不含Trp基因，在Trp缺失的培養(yǎng)基上無(wú)法生長(zhǎng)。當(dāng)誘餌載體（pGBKT7-Bait）成功轉(zhuǎn)入Y2HGold，其在Trp缺失的培養(yǎng)基【即SD-Trp單缺培養(yǎng)基】上就能正常生長(zhǎng)。同理，后者的親代酵母菌株（如Y187）本身不含Leu基因，在Leu缺失的培養(yǎng)基上無(wú)法生長(zhǎng)。但當(dāng)誘捕載體（pGADT7-Prey）成功轉(zhuǎn)入Y187，其在Leu缺失的培養(yǎng)基【即SD-Leu單缺培養(yǎng)基】上能正常生長(zhǎng)。

選擇性氨基酸混合物（DO medium supplements）類別和應(yīng)用：

不管是*種方式還是第二種方式配制的酵母選擇營(yíng)養(yǎng)缺陷型培養(yǎng)基（SD Media）配制的關(guān)鍵在于選擇合適的選擇性/缺陷型氨基酸混合物（DO supplement）來(lái)配制特定的培養(yǎng)基，從而滿足特定的需求。如何選擇合適的選擇性氨基酸混合物，見(jiàn)表1。

根據(jù)氨基酸缺失數(shù)目分為單缺氨基酸混合物（Single Dropout Supplements，SDO），雙缺氨基酸混合物（Double  Dropout Supplements，DDO），以此類推。

主要應(yīng)用：

1. 營(yíng)養(yǎng)缺陷型表型的確認(rèn)
2. 酵母轉(zhuǎn)化陽(yáng)性菌株的篩選
3. 酵母雙雜交篩選
4. 酵母單雜交選擇

選擇性氨基酸混合物（DO medium supplements）訂購(gòu)信息：現(xiàn)貨供應(yīng)，性價(jià)比高，。

【重要消息】：

1. 見(jiàn)我司（懋康生物）整理的酵母雙雜交（Yeast two-hybrid assays）產(chǎn)品專題，從酵母菌株、酵母質(zhì)粒、酵母培養(yǎng)基到篩選標(biāo)志（抗生素），。
2. 見(jiàn)我司（懋康生物）的酵母雙雜交系列產(chǎn)品*活動(dòng)，屬于你的福利，當(dāng)然要享受起來(lái)。。
3. 見(jiàn)我司（懋康生物）整理的無(wú)氨基酸酵母氮源基礎(chǔ)（BD Difco，YNB without amino acids）產(chǎn)品信息，。

相關(guān)產(chǎn)品：產(chǎn)品具體信息。

【特別提醒】：

1. 我司（懋康生物）可根據(jù)需求定制只符合您的缺陷型氨基酸混合物，有求并有應(yīng)，詳情。
2. 我司（懋康生物）提供預(yù)混好的酵母選擇營(yíng)養(yǎng)缺陷完整培養(yǎng)基系列凍干粉，使用更加簡(jiǎn)單快捷，詳情。

 — —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】

上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域研究的試劑、儀器和實(shí)驗(yàn)室消耗品與實(shí)驗(yàn)服務(wù)工作，主要從事細(xì)胞生物學(xué)、植物學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、蛋白組學(xué)。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)等領(lǐng)域。 本公司秉承“以人為本，以誠(chéng)為信、合同守信”的經(jīng)營(yíng)理念。堅(jiān)持"品質(zhì)保障"的原則為廣大客戶提供產(chǎn)品。