螢火蟲螢光素酶報告基因檢測 探針與染色
簡要描述：
螢火蟲螢光素酶報告基因檢測 探針與染色 螢火蟲螢光素酶（Firefly Luciferase）普遍用作一種報告基因來研究基因調(diào)控和功能，以及用于藥物篩選。由于哺乳動物細胞或組織缺乏任何內(nèi)源性的熒光素酶活性和生物發(fā)光的天然屬性，螢火蟲熒光素酶是一種非常靈敏的遺傳報告子。
產(chǎn)品時間：2024-03-14
打印當前頁Firefly Luciferase Reporter Gene Assay Kit
螢火蟲螢光素酶報告基因檢測試劑盒
產(chǎn)品標簽
Firefly Luciferase 螢火蟲熒光素酶；Photinus pyralis；報告基因檢測；D-luciferin sodium D-熒光su鈉鹽；ATP生物發(fā)光檢測；CAS：61970-00-1；
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 價格（元） |
Firefly Luciferase Reporter Gene Assay Kit 螢火蟲螢光素酶報告基因檢測試劑盒 | MF4001-100T | 100T | 716 |
MF4001-1000T | 1000T | 3966 |
產(chǎn)品描述
螢火蟲螢光素酶（Firefly Luciferase）普遍用作一種報告基因來研究基因調(diào)控和功能，以及用于藥物篩選。由于哺乳動物細胞或組織缺乏任何內(nèi)源性的熒光素酶活性和生物發(fā)光的天然屬性，螢火蟲熒光素酶是一種非常靈敏的遺傳報告子。螢火蟲螢光素酶是一種分子量~61kD的蛋白，在ATP、鎂離子和氧氣存在的條件下，可以催化螢光素（Luciferin）氧化成氧化熒光素（Oxyluciferin），在此氧化過程中釋放出生物螢光（Bioluminescence）。這一熒光可通過化學發(fā)光儀（Luminometer）或液閃測定儀進行測定。
本螢火蟲螢光素酶報告基因檢測試劑盒（Firefly Luciferase Reporter Gene Assay Kit），正是利用螢光素為底物來檢測細胞內(nèi)螢火蟲螢光素酶活性的試劑盒，操作簡單、快速、靈敏且呈良好的線性關(guān)系。
產(chǎn)品組分
組分編號 | 組分名稱 | 產(chǎn)品貨號（規(guī)格） | |
MF4001-100T | MF4001-1000T | ||
MF4001-A | Cell Culture Lysis Buffer細胞裂解液 | 60ml | 10×60ml |
MF4001-B | Luciferase Assay Reagent螢火蟲熒光素酶檢測試劑 | 10ml | 10×10ml |
保存與運輸方法
保存：細胞裂解液置于4℃保存三個月有效，-20℃保存一年有效；螢火蟲熒光素酶檢測試劑置于-20℃六個月有效，-80℃避光保存一年有效；
運輸：冰袋運輸。
注意事項
為了保證螢火蟲熒光素酶檢測試劑的穩(wěn)定性，建議初次使用進行適當分裝，避光凍存，盡量降低反復凍融次數(shù)。內(nèi)部測試顯示反復凍融三次對測定結(jié)果無明顯影響。
由于溫度對酶活性有影響，測定時樣品和試劑均需達到室溫后再進行測定。
為取得加測定結(jié)果，用單管的化學發(fā)光儀測定時，樣品和試劑混合后到測定前的時間需盡量控制在相同時間，比如30s內(nèi)；使用具化學發(fā)光測定功能的多功能熒光酶標儀時，hao xian把樣品全部加好，然后統(tǒng)一加入螢火蟲熒光素酶檢測試劑。
樣品和試劑混合后，必須等待1~2s，再進行測定。測定時間通常為10s，根據(jù)情況可適當延長或縮短，但同一批樣品宜使用相同的測定時間。
為避免由于質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細胞效率差異引起的誤差，可同時轉(zhuǎn)入海腎熒光素酶報告基因質(zhì)粒作為內(nèi)參，用我司的雙熒光素酶報告基因檢測試劑盒（貨號：MF4010-100T）進行檢測。
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用方法
一、 細胞裂解
1.1 將含轉(zhuǎn)染有報告基因質(zhì)粒的細胞內(nèi)的培養(yǎng)基去除，對于貼壁細胞直接加PBS輕輕洗滌，對于懸浮細胞，低速離心收集細胞后用PBS輕輕洗滌。
1.2 將細胞裂解液充分混勻后，按下表用量來加入適量細胞裂解液，之后將培養(yǎng)板放在微型振蕩器上室溫震蕩15min，以充分裂解細胞。
培養(yǎng)皿類型 | 96孔板 | 48孔板 | 24孔板 | 12孔板 | 6孔板 |
細胞裂解液（μl/孔） | 100 | 150 | 200 | 300 | 500 |
【注①】：如果熒光素酶的表達水平比較低，可嘗試使用更少的裂解液，例如6孔板的每孔用量可減少到100μl?！咀?/span>②】：細胞裂解后可立即測定熒光素酶活，也可置于-70℃凍存，避免反復凍融，待以后再測定。凍存樣品需充分融解，達到室溫后再進行酶活測定。 | |||||
1.3 將充分裂解后的產(chǎn)物于10,000~15,000rpm室溫離心3~5min，取上清用于測定。
二、 熒光素酶檢測
2.1 融解螢光素酶檢測試劑，并達到室溫。
2.2 按儀器說明書開啟化學發(fā)光儀或具有檢測化學發(fā)光功能的多功能酶標儀，設定參數(shù)，測定間隔設為2s，測定時間設為10s。
2.3 將細胞裂解產(chǎn)物按照20~100μl的體積加入測量管中（如果裂解產(chǎn)物足夠，請加入100μl；如果裂解產(chǎn)物不足可以適當減少用量，但同批裂解產(chǎn)物的使用量宜保持*）。
2.4 加入100μl螢光素酶檢測試劑，用槍打勻或用其它適當方式混勻后測定RLU（Relative light unit）。以細胞裂解液為空白對照。
相關(guān)產(chǎn)品
貨號 | 名稱 | 規(guī)格 |
MF4001-100T | Firefly Luciferase Reporter Gene Assay Kit 螢火蟲螢光素酶報告基因檢測 | 100T |
MF4006-100T | Renilla Luciferase Reporter Gene Assay Kit 海腎螢光素酶報告基因檢測 | 100T |
MF4010-100T | Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit 雙熒光素酶報告基因檢測試劑盒 | 100T |
MX4602-100MG | D-Luciferin, Sodium Salt D-熒光su鈉鹽 | 100mg |
MX4603-100MG | D-Luciferin, Potassium Salt D-熒光素鉀鹽 | 100mg |
MX4606-500UG | Coelenterazine Native 天然腔腸素 | 500μg |
MX4608-500UG | Coelenterazine h 腔腸素h | 500μg |
— —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】
上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學和生物技術(shù)領域研究的試劑、儀器和實驗室消耗品與實驗服務工作，主要從事細胞生物學、植物學、分子生物學、免疫學、生物化學、蛋白組學。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)等領域。 本公司秉承“以人為本，以誠為信、合同守信"的經(jīng)營理念。堅持"品質(zhì)保障"的原則為廣大客戶提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品。
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